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Structural basis underlying the electron transfer features of a blue copper protein auracyanin from the photosynthetic bacterium Roseiflexus castenholzii

发布时间 : 2020-01-13

金色蓝素蛋白(Auracyanin,Au)是丝状不产氧光合细菌中发现的一类蓝铜蛋白,介导其循环电子传递链中替代复合物III和反应中心之间的电子传递。

为了阐明金色蓝素(Au)在电子传递中的作用机制,我们从光合玫瑰菌中提取并纯化出空气氧化的Au,并揭示了其传递电子的结构基础。首先我们通过光谱分析和酶活实验,测定了Au接受替代复合物III(ACIII)氧化甲基萘醌-4MK4)或甲基萘醌-7MK7)所释放的电子,并被还原的活性。进一步通过X-射线晶体衍射的方法解析了Au在氧化态2.2 Å和连二亚硫酸钠还原态2.0 Å分辨率的空间结构。整个结构包含2α螺旋、8β折叠和一个铜离子。在氧化态结构中,Cu2+His77Cys141His146Met151结合;还原态结构中,Cu1+结合口袋周围的两段looploop-Aloop-B)发生轻微的构象变化,Cu1+-SδMet151)的距离增大了0.3 Å。根据还原和氧化状态结构的傅立叶差值图,我们发现Au接受的电子传递到了Cu1+His77loop-B周围。此外,结合N-端测序和质谱检测,我们发现Au可能通过N端一段富含甘氨酸的序列锚定在细菌的质膜上,在膜周质侧来回摆动铜离子结合结构域;而铜离子结合口袋周围一个保守的疏水表面,可能介导与ACIIIRC的相互结合,起到循环传递电子的作用。

AU overview

此工作基于天然提取的Au在氧化态和还原态的高分辨率晶体结构,综合催化活性、构象变化和Fourier差值分析,创新性地揭示了其传递电子的结构基础和作用机制,为后续电子循环传递机理的研究奠定了基础。

硕士研究生王超和辛越勇副研究员为共同第一作者,徐晓玲教授为通讯作者,该研究得到国家自然科学基金和浙江省自然科学基金等项目的资助。

文章链接:https://link.springer.com/article/10.1007/s11120-020-00709-y.

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